Передовые технологии фильтрации и водоподготовки

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ. ИСПЫТАНИЕ СТЕРИЛИЗУЮЩЕЙ СПОСОБНОСТИ МЕМБРАННЫХ ФИЛЬТРОВ ДИСКОВОГО ТИПА МУ 42-51-17-93

1. Общие положения

1.1. Методические указания устанавливают порядок подготовки и проведения испытания стерилизующей способности мембранных фильтров дискового типа, предназначенных для стерилизующей фильтрации водных и органических растворов лекарственных веществ, воды, спиртов и органических растворителей, используемых в производстве инъекционных лекарственных средств.
1.2. Под мембранными фильтрами дискового типа (мембранами) подразумеваются пористые пленки с порами размером 0,22 мкм, изготовленные из полимерных материалов на основе производных, целлюлозы, полиамида, политетра - фторэтилена, поливинилидендифторида и др.
1.3. Под стерилизующей способностью подразумевается абсолютная способность мембран задерживать микроорганизмы и частицы другой природы с размерами равными или более 0,22 мкм.
1.4. Основанием для оценки стерилизующей способности мембран является способность тест - культуры Pseudomonas diminuta ATCC 19146 частично проходить через мембрану с порами размером 0,45 мкм и полностью задерживаться на мембране с порами размером 0,22 мкм.
1.5. Испытание должно проводиться в "чистом" помещении на рабочем месте, оборудованном установкой подачи ламинарного потока стерильного воздуха (1 класс чистоты).
1.6. Персонал, проводящий испытание, должен работать в стерильной технологической одежде из безворсовой ткани и в перчатках

2. Подготовка к проведению испытания

2.1. Испытание следует проводить с использованием фильтрационной установки, включающей фильтродержатель, соединенный с колбой Бунзена. Можно использовать установки типа XX 1004720 фирмы "Миллипор" или аналогичные фильтрационные установки фирмы "Зейтц" и др.
2.2. Для проведения испытания от каждой партии мембран отбирать не менее 1% от их общего количества.
2.3. Из каждой мембраны (диаметром 293 мм или 142 мм) вырезать по шаблону по 3 диска диаметром 47 мм. При вырезки дисков во избежание повреждения мембрану поместить между двумя листами фильтровальной бумаги.
2.4. При испытании стерилизующей способности мембран типа Владипор МФА-А диски погрузить в воду очищенную для полного смачивания, после чего поместить в фильтрационные установки. Сверху на испытуемую мембрану уложить 1 диск предфильтра или фильтровальной бумаги, также предварительно смоченный.
2.5. В качестве контроля использовать мембраны с порами размером 0,22 мкм и 0,45 мкм фирм "Миллипор", "Сарториус", "Гельман" и др.
2.6. Собранные установки стерилизовать в автоклаве при избыточном давлении 0,11 МПа (1,1 кгс/кв. см) и температуре (120+/-1) град. С в течение 30 минут.
2.7. Для проведения испытания стерилизующей способности мембран используют тест - культуру Pseudomonas diminuta ATCC 19146, представляющую собой мелкие кокковидные палочки размером (0,3-0,4) х (0,8-1,0) мкм преимущественно в виде одиночных клеток; грамотрицательна, не образует спор, характеризуется одиночными полярными жгутиками. На агаризованной питательной среде культура образует колонии светло - бежевого цвета, выпуклые, блестящие с ровными краями. При росте в жидкой питательной среде часто образует пленку на поверхности среды.
2.8. Тест культуру Pseudomonas diminuta ATCC 19146 выращивают при температуре 32 град. С в течение 22-24 часов в солевом лактозном бульоне с целью получения суспензии культуры с концентрацией равной 10 микроорганизмов в 1 мл среды.
2.9. Химическая посуда и растворы, используемые для работы, должны быть стерильными.

3. Проведение испытания

3.1. Испытание проводить под вакуумом.
3.2. По 50 мл суспензии культуры фильтровать через каждую испытуемую мембрану и через обе контрольные мембраны.
3.3. Каждый фильтрат высевать по 10 мл в 5 конических колб с тиогликолевой средой разлитой по 50 мл.
3.4. Посевы инкубировать при температуре 32 град. С в течение 2-3 суток.

4. Учет результатов

4.1. Тиогликолевые среды, в которые высевали фильтраты, полученные после фильтрования суспензий через испытуемую мембрану и контрольную мембрану с порами размером 0,22 мкм, должны быть стерильными.
4.2. В тиогликолевой среде, в которую высевали фильтрат, полученный после фильтрования суспензии через контрольную мембрану с порами размером 0,45 мкм, должен быть обнаружен рост тест - культуры.
4.3. Из проросших сред сделать высев на поверхность питательного агара в чашках Петри. По внешнему виду колоний, а также при микроскопировании установить наличие тест культуры.
4.4. При обнаружении тест - культуры в тиогликолевой среде, в которую высевали фильтраты, полученные после фильтрования суспензии через испытуемые мембраны, испытание следует повторить.
4.5. При повторном обнаружении роста тест - культуры в тиогликолевой среде партия мембран бракуется.